MÉTODO DE CONCENTRACIÓN POR SEDIMENTACIÓN RITCHIE

FUNDAMENTO:

se basa en la concentración de los quistes y huevos por sedimentación mediante la centrifugación, con la ayuda de formol y éter para separar y visualizar los elementos parasitarios.

una de las ventajas que tiene este método es concentrar y no deformar  las formas parasitarias, permite el transporte y almacenamiento de la materia fecal procesada antes de ser examinada, se usa cuando se necesita una técnica para evaluación de tratamiento y determinación de frecuencia.

MATERIAL Y EQUPO.

·         centrifuga

·         tubos de ensaye cónico de 15 ml

·         gasa cortada en cuadros

·         embudo de polietileno

·         vasos de precipitado de 50ml

·         aplacadores de madera

·         pipeta Pasteur

·         cubreobjetos

·         microscopio

Soluciones:

·         soluc. Salina isotónica

·         soluc. De formaldehido al 10%

·         éter

METODO

a)  Con el aplicador de madera se coloca aproximadamente 1 gr. de la materia fecal en el vaso de precipitado, se añaden 10 ml de solución salina y se homogeniza.

b) se filtra la suspensión a través de la gasa colocada en el embudo, recogiendo el filtrado en el tubo cónico.

c) Se centrifuga la suspensión durante 2 min. a 2000 rpm.

d) Se decanta el sobrenadante y se re suspende el sedimento con solución salina, centrifugando, decantando y re suspendiendo 2 veces más.

e) Al último sedimento se agregan 10 ml de solución de formaldehido al 10%, se mezcla y se deja reposar durante  10 mi.

f) Se añaden después de 5 ml de éter, se tapan los tubos con tapones de caucho y se agitan energéticamente durante 30 segundos.

g) se centrifuga durante 2 min a 2000 rpm.

h) Después de centrifugar se observan 4 capas:

·         éter en la superficial,

·         un tapón de restos fecales,        

·         formaldehido,

·         sedimento con el fondo del tubo, contenido lo elementos parasitarios.

i) Se decanta el sobrenadante

j) Se introduce la pipeta Pasteur hasta el sedimento, se extrae con cuidado una gota del sedimento y se coloca en un portaobjetos.

k) se le añade una gota de Lugo y con uno de los ángulos del cubreobjetos, se homogeniza, cubriéndolo con el mismo.

j) Se observa la preparación en el microscopio con objetivos de 10X y 40X

 

Conclusion: 

 se encontraron fibras de tejido y, restos de comida y algunas grasas.

Como puede verse, el resultado para huevecillos de parásitos resulto negativo.